Amidase (AMD)
Enzymen:Binne makromolekulêre biologyske katalysatoren, de measte enzymen binne aaiwiten
Amidase:Katalisearje de hydrolyse fan ferskate endogene en frjemde alifatyske en aromatyske amiden troch in acylgroep oer te dragen oan wetter mei de produksje fan frije soeren en ammoniak. Hydroxamyske soeren en oare organyske soeren wurde in soad brûkt as medisinen, om't se komponinten binne fan groeifaktoaren, antibiotika en tumorremmers. De amidases kinne wurde ferdield yn R-type en S-type acylasen neffens de stereoselektiviteit fan 'e katalysator.
Neist it katalysearjen fan 'e hydrolyse fan amiden, kin amidase ek acyl-oerdrachtreaksjes katalysearje yn 'e oanwêzigens fan ko-substraten lykas hydroxylamine.
Amidase mei ferskillende boarnen hawwe ferskillende substraatspesifisiteit, guon fan harren kinne allinich aromaatyske amiden hydrolysearje, guon fan harren kinne allinich alifatyske amiden hydrolysearje, en guon hydrolysearje α- of ω-amino-amiden. De measte aminen hawwe allinich goede katalytyske aktiviteit foar asyklyske of ienfâldige aromatyske amiden, mar foar komplekse aromaten binne heterosyklyske amiden, benammen amiden mei ortho-substituenten, oer it algemien leech yn aktiviteit (mar in pear enzymen litte bettere katalytyske effekten sjen).
Katalytysk meganisme:
| Enzymen | Produktkoade | Produktkoade |
| Enzympoeier | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | in set fan 19 amidases, 50 mg elk 19 items * 50 mg / item, of oare kwantiteit |
| Screeningkit (SynKit) | ES-AMD-1900 | in set fan 19 amidases, 1 mg elk 19 items * 1 mg / item |
★ Hege substraatspesifisiteit.
★ Sterke chirale selektiviteit.
★ Hege konverzje-effisjinsje.
★ Minder byprodukten.
★ Milde reaksjebetingsten.
★ Miljeufreonlik.
➢ Enzymscreening moat útfierd wurde foar spesifike substraten fanwegen de substraatspesifisiteit, en in enzym krije dat it doelsubstraat mei it bêste katalytyske effekt katalysearret.
➢ Nea kontakt meitsje mei ekstreme omstannichheden lykas: hege temperatuer, hege/lege pH en organyske oplosmiddels mei hege konsintraasje.
➢ Normaal moat it reaksjesysteem in substraat en bufferoplossing (de optimale reaksje-pH fan it enzym) omfetsje. Kosubstraten lykas hydroxylamine moatte oanwêzich wêze yn it acyl-oerdrachtreaksjesysteem.
➢ AMD moat as lêste tafoege wurde oan it reaksjesysteem mei optimale reaksje-pH en -temperatuer.
➢ Alle soarten AMD hawwe ferskate optimale reaksjebetingsten, dus elk fan harren moat fierder yndividueel bestudearre wurde.
Foarbyld 1(1):
Hydrolyse-aktiviteit oan ferskate amidesubstraten
| Substraat | Spesifike aktiviteit μmol min-1mg-1 | Substraat | Spesifike aktiviteit μmol min-1mg-1 |
| Acetamide | 3.8 | ο-OH benzamide | 1.4 |
| Propionamide | 3.9 | p-OH benzamide | 1.2 |
| Laktamide | 12.8 | ο-NH2benzamide | 1.0 |
| Butyramide | 11.9 | p-NH2benzamide | 0.8 |
| Isobutyramide | 26.2 | ο-Toluamide | 0.3 |
| Pentanamide | 22.0 | p-Toluamide | 8.1 |
| Heksanamide | 6.4 | Nikotinamide | 1.7 |
| Sykloheksanamide | 19.5 | Isonicotinamide | 1.8 |
| Akrylamide | 10.2 | Picolinamide | 2.1 |
| Metakrylamide | 3.5 | 3-Fenylpropionamide | 7.6 |
| Prolinamide | 3.4 | Indol-3-asetamide | 1.9 |
| Benzamide | 6.8 |
De reaksje waard útfierd yn 50 mM natriumfosfaatbufferoplossing, pH 7.5, by 70 ℃.
| Amiden | Hydroxylamine | Hydrazine |
| Acetamide | 8.4 | 1.4 |
| Propionamide | 18.4 | 3.0 |
| Isobutyramide | 25.0 | 22.7 |
| Benzamide | 9.2 | 6.1 |
De reaksje waard útfierd yn 50 mM natriumfosfaatbufferoplossing, pH 7.5, by 70 ℃.
Relatearre reagenskonsintraasje: amiden, 100 mM (benzamide, 10 mM); hydroxylamine en hydrazine, 400 mM; enzyme 0.9 μM.
Foarbyld 2(2):
Foarbyld 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al. Prosesbiogemy, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al. Bioorganyske skiekunde, 2017, Beskikber online 7.
